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技術文章
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標記二抗的選擇及應用實例
2023-05-11
標記二抗的作用:二抗是在其它宿主體內制備的能與一抗或一抗片段結合的抗體,上面通常連有酶或熒光素等標簽。由于標記二抗所具備的優點使得其在免疫學實驗中得以應用廣泛,如westernblot(通過與特異性抗體結合來鑒定蛋白質),ELISA,免疫組織化學(檢測組織中的特異性抗原),免疫細胞化學(通過免疫學方法檢測細胞的抗原組成),流式細胞術及免疫沉淀(通過抗原與抗體的特異性結合作用來分離相應抗原)。二抗針對某一特定物種(如小鼠)的所有抗體均具有特異性,因而使用標記二抗可以免去對每一個...
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選購線粒體染色試劑盒要考慮哪些因素?
2023-04-13
線粒體染色試劑盒是一種用于分離、純化、檢測和定量分析線粒體的試劑盒。它可以用于研究線粒體DNA含量、線粒體膜電位、線粒體膜透過性等線粒體功能和結構方面的內容。其作用和原理如下:線粒體染色試劑盒作用:1.分離和純化線粒體:通過離心、低速離心分離和高速離心純化方法,使線粒體從細胞中分離出來。2.檢測線粒體DNA含量:線粒體染色試劑盒可以檢測線粒體DNA含量。3.測量線粒體膜電位:線粒體染色試劑盒還可以測量線粒體膜電位。4.測量線粒體膜透過性:線粒體染色試劑盒可以測量線粒體膜透過性...
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蛋白電泳試劑盒的操作方法介紹
2023-04-04
蛋白電泳試劑盒是一種用于分離和檢測蛋白質的實驗材料。它包含有需要用到的試劑和工具,可以快速、方便地進行蛋白質分離和檢測。蛋白電泳試劑盒主要用于分離和檢測蛋白質樣品。通過其含有的試劑和工具,可以進行凝膠制備、電泳分離、染色和凝膠圖像分析等步驟,實現不同數量和質量的蛋白質的分離和檢測。蛋白電泳試劑盒的原理是利用電泳技術分離蛋白質,當電場作用于凝膠中的蛋白質時,它們會向負極移動。不同大小和電荷的蛋白質會根據其遷移速度和遷移距離而分離出來。分離完成后,通過染色方法可以使蛋白質產生顏色...
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瓊脂糖凝膠與核酸電泳小知識分享
2023-03-20
影響核酸電泳遷移率的幾個因素1、核酸分子大小在一定濃度的瓊脂糖凝膠中,DNA片段遷移距離和其含有的堿基對數量成反比,因此可以通過與標準條帶遷移距離進行比較,由此得出目的條帶的大小,但這僅對雙鏈線性的DNA比較準確(DNAMarker一般為雙鏈線狀DNA),且對大于20kb的DNA不適用(普通瓊脂糖凝膠很難將其分開)。2、核酸分子構象DNA分子在電場中的遷移速度不僅和分子量有關,還和它本身的構象有關。相同分子量的線狀、開環和超螺旋DNA在瓊脂糖凝膠中的移動速度不一樣,移動速度次...
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簡單介紹PEI轉染試劑的保存方法
2023-03-15
一、PEI轉染試劑的作用PEI轉染試劑,全稱聚乙烯亞胺(polyethylenimine),是一種常見的DNA、RNA質粒轉染試劑。PEI會與DNA形成一種復合物,并將DNA導入人體細胞內,使其表達您需要的蛋白質。二、PEI轉染試劑的原理PEI轉染試劑的原理是利用PEI分子所帶上的各種官能團對DNA或RNA質粒進行吸附,形成一個復合物,再將該復合物轉運至細胞內,使DNA或RNA質粒得以進入細胞,并在細胞內進行表達。而PEI分子帶上的陽離子基團能夠與細胞的負電荷相結合,從而達到...
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高保真DNA聚合酶的操作方法介紹
2023-03-09
高保真DNA聚合酶是一種具有高準確性和高速度的酶,廣泛應用于PCR擴增、突變篩選、基因克隆、DNA測序等領域。其在基因工程和生物技術研究中有著十分重要的作用。作用原理:高保真DNA聚合酶可將DNA單鏈合成DNA雙鏈,并對DNA進行擴增。該酶的作用機理基于DNA聚合酶基本的催化反應機制:利用DNA單鏈為模板,在DNA聚合酶的作用下,引物與模板互補結合進行DNA聚合反應。高保真DNA聚合酶的主要特點是:具有一定的3’-5’外切活性,能修正因PCR擴增引入的多種誤差,如插入、缺失、...
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DNA聚合酶和RNA聚合酶的異同點
2023-02-22
DNA聚合酶是細胞復制DNA的重要作用酶,目前為止已發現有5種DNA聚合酶,分別為DNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ,都與DNA鏈的延長有關。DNA聚合酶RNA聚合酶的相同點:都能以DNA為模板,從5'向3'進行核苷酸或脫氧核苷酸的聚合反應。DNA聚合酶RNA聚合酶的不同點:1、作用底物不同。RNA聚合酶底物是NTP;DNA聚合酶底物是dNTP。2、RNA聚合酶作用不需要引物,而DNA聚合酶作用需要引物。3、RNA聚合酶本身具有一定的解旋功能,而DNA聚合酶沒有,當需要解開雙鏈的...
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細胞凍存和細胞凍存步驟
2023-01-16
細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術將細胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細胞暫時脫離生長狀態而將其細胞特性保存起來,這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。而細胞凍存步驟及細胞凍存液的選擇也是影響細胞凍存效率及解凍復蘇后細胞活力的主要條件。下面就以細胞凍存液為例講解細胞凍存原理及細胞凍存的步驟。細胞凍存及復蘇的基本原則是慢凍快融,實驗證明這樣可以最大限度的保存細胞活力。目前細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質能提高細胞膜對水的通透性,加上緩慢冷凍可使...
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