Lj 2 x HotStart Taq Master Mix

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產(chǎn)品描述

本制品是將PCR反應(yīng)所需的HotStart Taq酶、dNTP s 、MgCL2 以及反應(yīng)提沖液預(yù)先配制成2倍濃度的混合物。使用時(shí)只需加入模板和引物并稀釋到1倍濃度即可進(jìn)行PCR反應(yīng)，大大地簡(jiǎn)化了操作過程，減少了PCR操作過程中的污染。本制品所使用的HotStart Taq是經(jīng)特殊工藝處理后的Taq酶，在加熱至高溫前，其聚合陪活性被抑制從而抑制低源條件下由引物的非特異性退火或引物二聚體引起的非特異性。

本制品適用于高特異性PCR反應(yīng)、Multiplex PCR、高GC含量（>60%），有二級(jí)結(jié)構(gòu)等有較強(qiáng)背景的基因組擴(kuò)增和大規(guī)模基因組擴(kuò)增檢測(cè)。

本產(chǎn)品經(jīng)多次柱純化，SDS-PAGE檢測(cè)僅見清晰單一條帶，PCR檢測(cè)無(wú)大腸桿菌DNA殘留，未發(fā)現(xiàn)核酸內(nèi)、外切酶活性。

活性定義

熱激活后，在74℃條件下，30分鐘內(nèi)催化10nmol dNTPs的摻入反應(yīng)為酸不溶性物質(zhì)所需的酶量為一個(gè)單位(1U)。

產(chǎn)品特點(diǎn)

簡(jiǎn)便：無(wú)需改變常規(guī)熱啟動(dòng)酶PCR程序，可在所有正常PCR程序中實(shí)現(xiàn)熱啟動(dòng)PCR的效果。

：有效減少了雜帶及拖帶產(chǎn)生，從而實(shí)現(xiàn)高特異性的PCR。

靈敏：可從0.05ng人基因組DNA模板中擴(kuò)增出特定基因片段。

使用建議

使用本試劑擴(kuò)增得到的PCR產(chǎn)物3´端有一突出"A"堿基，可直接克隆于T-vector中。

運(yùn)輸和儲(chǔ)存

-20℃運(yùn)輸和保存，避免反復(fù)凍融，在保存條件下可保存1年。

使用方法

注意事項(xiàng)

1.   需溶解*后使用， 防止離子濃度不均勻。

2.   應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪x擇合適的循環(huán)數(shù)，循環(huán)數(shù)過少，會(huì)導(dǎo)致擴(kuò)增量不足。循環(huán)數(shù)過多，擴(kuò)增量增加，但突變率會(huì)增加，并造成非特異性擴(kuò)增。

3.   根據(jù)引物Tm 值設(shè)置合適的退火溫度，退火溫度過低，會(huì)造成非特性擴(kuò)增。退火溫度過高，可能擴(kuò)增不到目的條帶。